Çfarë është testi i endotoksinave?

Çfarë është testi i endotoksinave?

Endotoksinat janë molekula hidrofobike që janë pjesë e kompleksit lipopolisakarid që formon pjesën më të madhe të membranës së jashtme të baktereve Gram-negative.Ato çlirohen kur bakteret vdesin dhe membranat e tyre të jashtme shpërbëhen.Endotoksinat konsiderohen si kontribuesit kryesorë në përgjigjen pirogjene.Dhe produktet parenteral të kontaminuara me pirogjenë mund të çojnë në zhvillimin e etheve, nxitjen e përgjigjes inflamatore, shokun, dështimin e organeve dhe vdekjen tek njerëzit.

Testi i endotoksinave është testi për zbulimin ose përcaktimin sasior të endotoksinave nga bakteret gram-negative.

Lepujt përdoren për të zbuluar dhe për të përcaktuar sasinë e endotoksinave në produktet farmaceutike në fillim.Sipas USP, RPT përfshin monitorimin për një rritje të temperaturës ose temperaturë pas injektimit intravenoz të ilaçit te lepujt.Dhe 21 CFR 610.13(b) kërkon një test pirogjen lepuri për produkte biologjike të specifikuara.

Në vitet 1960, Fredrick Bang dhe Jack Levin zbuluan se amebocitet e gaforres patkua do të mpiksen në prani të endotoksinave.TëLimulus Amebocyte Lisate(ose Tachypleus Amebocyte Lisate) u zhvillua në përputhje me rrethanat për të zëvendësuar shumicën e RPT.Në USP, testi LAL quhet testi i endotoksinës bakteriale (BET).Dhe BET mund të bëhet duke përdorur 3 teknika: 1) teknikën xhel-clot;2) teknika turbidimetrike;3) teknika kromogjenike.Kërkesat për testin LAL përmbajnë pH optimale, forcën jonike, temperaturën dhe kohën e inkubacionit.

Krahasuar me RPT, BET është i shpejtë dhe efikas.Megjithatë, BET nuk mund ta zëvendësonte plotësisht RPT-në.Sepse analiza LAL mund të ndërhyhet nga faktorë dhe nuk është në gjendje të zbulojë pirogjenët jo-endotoksina.